RNA interference
在杂交之前先用凝胶电泳将粗提取物中的 RNA 或 DNA 分子进行分离,假定杂交后只有千种或少数几种大小的片段被探针杂交上了,就能肯定这种杂交是特异性的。
反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板,在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以 RNA 为模板合成的 DNA 是互补 DNA(complementary DNA,cDNA)。若是以DNA模板合成 DNA,dNTP 的掺人速度很低(约 5个核苷酸/秒),比 T7DNA聚合酶的合成速度差不多低 100 倍。
在 Northern 杂交中,为了防止 RNA 形成部分环状发夹结构影响迁移率,所以要用变性缓冲液进行电泳。